Alcohol Acetona de Gram

Características Alcohol Acetona de Gram

Aplicación

Para su uso in vitro en el método de coloración Gram para la diferenciación de bacterias Gram positivas y Gram negativas.

Muestra 

Frotis de material bacteriológico secados al aire como esputos, frotis tomados de punciones aspirativas, soluciones de lavado, efusiones, pus, exsudados, cultivos líquidos y sólidos.

Materiales requeridos no suministrados 

• Soporte de coloración
• Agua de grifo
• Asa estéril
• Microscopio
• Aceite de inmersión
• Lámina Portaobjetos

Procedimiento

1. Prepare una extensión fina, uniforme de muestra y seque al aire.

2. Fije al calor y deje enfriar.

3. Cubra el portaobjetos con Violeta de Gram y deje reposar durante 5 segundos a 1 minuto y lave cuidadosamente con agua de grifo.

4. Cubra el frotis con lugol de Gram y deje reposar durante 10 segundos a 1 minuto y lave con agua.

5. Decolore suavemente con alcohol acetona de 5 - 30 segundos y lave con agua de grifo.

6. Cubrir con Fucsina o safranina durante 5 a 30 segundos y lave con agua corriente.

7. Deja secar al ambiente y examinar el frotis coloreado con aceite de inmersión.

Notas del procedimiento

El procedimiento se puede modificar de acuerdo con las preferencias del usuario para lograr una intensidad de color más débil o más fuerte, cambiando los tiempos de tinción, lavado, etc. Los frotis o cultivos viejos podrían dar resultados atípicos, es por esto que se recomiendan utilizar cultivos o frotis recientes (18-24 horas). Es muy importante controlar la fijación por calor (unos pocos segundos), cualquier exceso de calentamiento podría producir resultados erróneos. El agua del grifo altamente clorada podría debilitar la contratinción.