Orange G

Los núcleos son coloreados con la Hematoxilina (coloración básica), el citoplasma con un colorante de naturaleza alcohólica y policromática: coloración de Eosina EA 50 (coloración ácida); y la queratina citoplasmática, cuando está presente, se colorea con Orange G Consta de cuatro pasos principales: 1. Eliminación del fijadorhidratación, 2. Tinción del núcleo con la hematoxilina. 3. Tinción del citoplasma con Orange G y EA. 4. Aclaramiento

APLICACIÓN

La tinción de Papanicolaou se aplica a exudados vaginales para la detección de cáncer uterino o vaginal. Para uso de diagnóstico in vitro IVD.

PREPARACION DE LOS REACTIVOS

Los reactivos vienen listos para su uso

MUESTRAS

Ginecológicas

MATERIAL REQUERIDO NO SUMINISTRADO

• Fijador Cubetas o recipientes para tinción
• Alcohol Xilol
• Resina sintética

PROCEDIMIENTO

Una vez fijado el extendido, se inicia el proceso sumergiendo en:

a. Alcohol corriente al 96% por 10 segundos

b. Lavar con abundante agua de grifo

Luego sumergir en:

c. Hematoxilina por espacio de 3 a 5 minutos

d. Lavar con abundante agua de grifo

e. Sumergir en solución acuosa de HCI al 0,5% de 1 a 4 veces hasta que empiece a cambiar de color

f. Lavar con abundante agua de grifo

g. Sumergir en agua amoniaco al 0,5%

h. Lavar con abundante agua de grifo Secar cuidadosamente el exceso de agua,

Luego sumergir en:

i. Alcohol corriente al 96% por 10 segundos

j. Orange G por 2 minutos

k. Alcohol corriente al 96% por 5 segundos

l. Alcohol corriente al 96% por 5 segundos

m. EA-50 por 2 minutos Luego deshidratar sucesivamente en:

n. Alcohol corriente al 96% por 5 segundos

o. Alcohol corriente al 96% por 5 segundos

p. Alcohol absoluto por 10 segundos

q. Alcohol absoluto por 10 segundos

Luego sumergir sucesivamente en:

r. Xilol por 10 segundos

Para el montaje sobre la lámina portaobjeto, aún húmeda, usar una a dos gotas bálsamo de Canadá y cubrir con laminilla o, con resina sintética previo secado de la lámina portaobjeto. En caso de aplicar líquido de montaje sobre el frotis, no se requiere el uso de laminilla cubre objeto.

RESULTADOS

Núcleos: La cromatina y la membrana nuclear toman el color azul oscuro o púrpura mientras el núcleo lo obtiene el color rojo, rosado o naranja. Citoplasma: Adopta el color amarillo o naranja, si hay presencia de queratina. Caso contrario el color varía de verde, azul o gris

ALMACENAMIENTO

Almacenar a temperatura de ambiente entre 10 – 35 º C protegido de la luz. Mantener bien cerrado el reactivo.

ESTABILIDAD

Los productos son estables hasta su fecha de expiración como aparece en la etiqueta del producto.

PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS

• Mantener normas de Higiene en el Laboratorio.

• No exponer a la Luz.

• No utilizar los colorantes vencidos.

• No inhalar las soluciones.

• No mezclar los reactivos con otros lotes.

• Filtrar las soluciones periódicamente.